Startseite»Leistungen»Laborleistungen»Ökotoxizität»Bakterien» Pseudomonas Wachstumshemmtest

Pseudomonas putida Wachstumshemmtest

DIN EN ISO 10712

Prinzip

Der Pseudomonas-Zellvermehrungs-Hemmtest ist ein Test zur Bestimmung der chronischen Toxizität von Wasser und wasserlöslichen Stoffen auf Bakterien. Verwendet werden Pseudomonas putida als Stellvertreter für heterotrophe Mikroorganismen im Süßwasser. Die Testbakterien werden in einer definierten Nährlösung mit einer Konzentrationsreihe der Prüfsubstanz über mehrere Generationen kultiviert.

Kurzbeschreibung

In Vortests wird zunächst der toxische Konzentrationsbereich der Prüfsubstanz bestimmt. Im Haupttest werden dann je 3 Parallelansätze einer Verdünnungsreihe im relevanten Bereich sowie der Kontrollen ohne Prüfsubstanz untersucht: Zu jedem Ansatz wird eine definierte Bakteriensuspension (entsprechend 10 Formazin-Trübungseinheiten) gegeben. Nach 16 ± 1 h wird die Zellkonzentration mittels Trübungsmessung bei 436 nm ermittelt. Die Dosis-Wirkungsbeziehung wird über eine Regressionsanalyse nach log-Probit-Transformation der Wertepaare berechnet und hieraus als Ergebnis die 10%ige und 50%ige Effektkonzentration auf das Wachstum (EC50) bestimmt.

Parallel hierzu wird die Referenzsubstanz 3,5-Dichlorphenol (EC50 10-30 mg/l) mitgetestet.

Der Ausschuss für Biologische Arbeitsstoffe hat den in der Norm verwendeten Stamm in Risikogruppe 2 eingestuft (vgl. TRBA 466, vorher war er Risikogruppe 1 zugeordnet). Der Versuch wird daher von der Hydrotox GmbH nicht mehr angeboten.